Il existe de nombreux fragments cellulaires après lyse mécanique de la suspension cellulaire.Comment supprimer ces fragments ?Jetons un coup d'œil aux différentes approches :

1. Utilisez la méthode de dilution.Lorsque les cellules sont diluées, elles peuvent également proliférer, elles deviendront de plus en plus nombreuses et les débris cellulaires deviendront en conséquence de moins en moins nombreux.
2. Il existe également un habitat naturel.Les cellules se déposent plus rapidement que la plupart des fragments : déplacez la suspension cellulaire dans letube à centrifuger, et lorsque la plupart des cellules coulent, la solution supérieure peut être aspirée, puis ajoutée à la solution de culture pour suspendre les cellules.Cette méthode peut être utilisée à plusieurs reprises, tout en observant à chaque fois si elle répond à vos exigences au microscope.
3. Centrifugeuse à basse vitessepeut enlever les débris, généralement 700 g, 5 minutes
4. Lors de la centrifugation, à condition que le nombre de cellules soit suffisant, réduisez le temps de centrifugation, par exemple 5min, 1000rpm, au lieu de 3min, 1000rpm, et retirez le surnageant, car la nécrose et les débris sont généralement dans le surnageant !Cette opération ne doit être effectuée qu’une seule fois pendant le processus de lavage avant l’incubation !

Bien qu'il existe de nombreuses façons d'éliminer les débris cellulaires, vous constaterez que la centrifugation est l'une des méthodes les plus efficaces !

Et comme les tissus et les cellules végétales ont des parois cellulaires composées de cellulose, d'hémicellulose et de pectine, il est généralement nécessaire de broyer du sable de quartz ou de la poudre de verre avec une solution d'extraction appropriée ou de traiter avec de la cellulase pour atteindre cet objectif.La fragmentation des cellules bactériennes est plus difficile, car l'ensemble du squelette de la paroi cellulaire bactérienne est en réalité une liaison covalente de macromolécules kystiques de peptidoglycane, très résistantes.Les méthodes courantes pour briser les parois cellulaires bactériennes comprennent le concassage par ultrasons, le broyage au sable, l'extrusion à haute pression ou le traitement au lysozyme.Une fois les tissus et les cellules brisés, le tampon approprié est sélectionné pour extraire la protéine souhaitée.Les matières insolubles telles que les fragments cellulaires sont éliminées parcentrifugerou filtration.

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